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昨日，中國農業大學張同學咨詢：ELISA結果陰性值偏高怎么回事？陰性值與抗原、抗體稀釋度，尤其是抗體的稀釋度有關嗎？與不同的酶標板有關嗎？

技術答：可能和你底物緩沖液的PH值有關，通常是用 OPD 呈色，我們實驗室也有人用 TMD 呈色，也碰過背景值過高的問題，后來檢討造成背景值過高的原因可能為，一是呈色時沒有避光，二是底物緩沖液的PH值不對。

一、TMB配置方法: 稱取固體 TMB 溶于 DMSO 配成 1mg/ml 液體避光保存 4度
用前要檢查其狀態，若有凝固，可用手溫將其融化。

二、底物緩沖液（Ph5.0）配置方法: 檸檬酸 1.02g，NaHPO4.12H2O 3.68g 溶于100ml水中。